一、细胞基本属性
细胞名称 小鼠腹腔主动脉外膜成纤维细胞(Mouse Abdominal Aorta Adventitial Fibroblasts)
细胞别称 MAAAF;主动脉外膜成纤维细胞;血管外膜细胞
种属来源 小鼠(Mus musculus)
年龄性别 健康成年鼠(性别不限,无心血管疾病史)
组织来源 腹腔主动脉外膜层(经胶原酶消化分离)
生长特性 贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态 长梭形或不规则三角形,胞质透亮,核仁明显
细胞代数 P3 - P10(维持成纤维细胞表型及功能特性)
细胞规格 5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基 Fibroblast Growth Medium(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件 气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件 血清型冻存液(含DMSO及胎牛血清),液氮气相长期保存
倍增时间 约36 - 48小时(与血清浓度正相关)
供应限制 仅用于基础研究,不可用于临床应用或转基因动物培育
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴轻柔解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱4小时再换液
传代标准 细胞融合度达80% - 90%(接触抑制后增殖减缓)
传代比例 1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 避免血清残留影响消化效率(建议PBS充分洗涤)
- 首次传代后48小时内避免移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方 含20%胎牛血清及10% DMSO的DMEM基础液
细胞密度 冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封
- 程序降温:4℃ 1h → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞转化潜能
四、售后服务承诺
重发标准
- 运输过程温度记录异常(需提供物流温度追踪报告)
- 72小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
- 种属鉴定结果与描述不符
不予重发情形
- 解冻后未按推荐密度接种导致细胞老化
- 自行修改冻存液配方引发冰晶损伤
- 未使用原代成纤维细胞专用培养基
- 超过说明书规定传代次数仍要求质保