小鼠腹腔主动脉外膜成纤维细胞

小鼠原代细胞

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XM-X04055×10^5小鼠原代细胞3600


一、细胞基本属性

细胞名称 小鼠腹腔主动脉外膜成纤维细胞(Mouse Abdominal Aorta Adventitial Fibroblasts)

细胞别称  MAAAF;主动脉外膜成纤维细胞;血管外膜细胞

种属来源  小鼠(Mus musculus)

年龄性别  健康成年鼠(性别不限,无心血管疾病史)

组织来源  腹腔主动脉外膜层(经胶原酶消化分离)

生长特性  贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被培养器皿)

细胞形态  长梭形或不规则三角形,胞质透亮,核仁明显

细胞代数  P3 - P10(维持成纤维细胞表型及功能特性)

细胞规格  5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含血清型冻存液)

培养基  Fibroblast Growth Medium(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)

培养条件  气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件  血清型冻存液(含DMSO及胎牛血清),液氮气相长期保存

倍增时间  约36 - 48小时(与血清浓度正相关)

供应限制  仅用于基础研究,不可用于临床应用或转基因动物培育


二、细胞培养操作指南

收货处理

  - 冻存管:37℃水浴轻柔解冻,离心后重悬于预热培养基

  - 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱4小时再换液

传代标准  细胞融合度达80% - 90%(接触抑制后增殖减缓)

传代比例  1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)

消化方法

  - 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液

  - 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

注意事项

  - 避免血清残留影响消化效率(建议PBS充分洗涤)

  - 首次传代后48小时内避免移动培养瓶


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方  含20%胎牛血清及10% DMSO的DMEM基础液

细胞密度  冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

冻存步骤

  - 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封

  - 程序降温:4℃ 1h → - 80℃过夜 → 液氮长期储存

复苏验证

  - 复苏后活率≥85%(台盼蓝染色法)

  - 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞转化潜能


四、售后服务承诺

重发标准

  - 运输过程温度记录异常(需提供物流温度追踪报告)

  - 72小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)

  - 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)

  - 种属鉴定结果与描述不符

不予重发情形

  - 解冻后未按推荐密度接种导致细胞老化

  - 自行修改冻存液配方引发冰晶损伤

  - 未使用原代成纤维细胞专用培养基

  - 超过说明书规定传代次数仍要求质保