一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠胃黏膜上皮细胞(Mouse Gastric Mucosal Epithelial Cells)
细胞别称:MGMEC;胃黏膜上皮细胞;胃上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无胃部疾病史)
组织来源:胃黏膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质黏附)
细胞形态:单层铺路石样,接触抑制后呈多边形紧密排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS+上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(与培养密度及传代频率相关)
供应限制:仅限于科学研究,不可用于临床治疗或商品化用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含钙镁离子平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 严格控制消化时间(避免细胞间紧密连接破坏)
- 传代后12小时内更换新鲜培养基以清除残余酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及低温保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格标准)
- 功能验证:粘液蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应保持特征性分泌功能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内确认微生物污染(需提供PCR或培养皿检测结果)
3. 复苏存活率低于承诺标准(台盼蓝染色法复检确认)
4. 细胞STR鉴定与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按说明书要求进行细胞复苏前预处理
2. 自行修改培养基配方导致细胞功能异常
3. 未使用指定冻存程序造成细胞损伤
4. 实验操作污染未及时反馈影响责任判定