一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠胃成纤维细胞(Murine Gastric Fibroblasts)
细胞别称:Gastric Fibroblasts;胃基质细胞;胃成纤维样细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体经病原体筛查)
组织来源:胃黏膜下层组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或纺锤状,呈放射状排列
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数保证功能活性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12+10% FBS+成纤维细胞生长添加剂
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(受血清浓度及细胞密度影响)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后,离心去除冻存液,重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
注意事项:
避免血清残留影响消化效率
首次换液需在贴壁后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+葡萄糖缓冲体系)
细胞密度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认表型稳定性
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染
3. 细胞复苏存活率低于80%(台盼蓝染色法)
4. 种属鉴定与承诺不符
不予重发情形:
1. 未使用配套培养基导致增殖异常
2. 传代次数超过推荐代数引发功能衰退
3. 未按操作规范进行胶原包被培养
4. 自行修改培养条件导致的表型改变