一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠小肠平滑肌细胞(Mouse Small Intestinal Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:SISMC;小肠平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:小肠组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,平行排列成束状
- 细胞代数:P3 - P8(维持收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+平滑肌生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受细胞密度与培养条件影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱中平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含适量Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(保护细胞收缩功能相关结构)
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持平滑肌标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供干冰包装状态证明)
- 72小时内确认支原体/细菌污染(需提供污染检测报告)
- 复苏后细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 细胞标志物检测与产品描述不符
- 不予重发情形:
- 收货后超过48小时未进行复苏操作
- 使用非推荐培养基导致细胞表型丢失
- 未按规范进行梯度降温造成冻存损伤
- 未定期检测支原体引发交叉污染