一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠结肠粘膜上皮细胞
- 细胞别称：结肠上皮细胞；肠道黏膜上皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：结肠黏膜层机械分离提取
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：铺路石样单层排列，接触抑制后呈现规则多边形
- 细胞代数：P3 - P6（维持肠道上皮极性特征与屏障功能）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：肠道上皮细胞专用培养基（含2% FBS+上皮细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含7% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃液氮保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与隐窝结构完整性相关）
- 供应限制：仅用于基础研究，不可用于药物开发或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻摇解冻，加入3mL预温培养基低速离心去冻存液
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱，静置4小时再换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（隐窝样结构形成时优先传代）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含钙离子螯合剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，边缘细胞脱离后立即终止反应
- 注意事项：
- 消化过程中轻拍培养瓶侧壁辅助解离
- 首次传代后需48小时内观察紧密连接蛋白ZO - 1表达
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞悬液经200×g离心5分钟
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期存储
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行活率检测（要求≥90%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P3代细胞应保持隐窝干细胞特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录显示超温≥10分钟（需提供物流温度曲线）
- 到货7日内PCR检测证实真菌/细菌污染
- 细胞贴壁率低于80%（需提供相差显微镜影像记录）
- 免疫荧光鉴定缺乏EpCAM阳性标记
- 不予重发情形：
- 解冻后未使用专用培养基扩增培养
- 机械刮取法传代导致细胞碎片增多
- 培养环境CO₂浓度长期偏离设定值
- 未按要求进行周期性消化酶活性校准
（注：本产品经β - catenin免疫荧光染色验证，符合肠道上皮干细胞特性，建议使用Transwell系统模拟体内黏膜屏障功能研究）
