一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肝外胆管上皮细胞（Mouse Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells）
- 细胞别称：MEBDEC；胆管上皮细胞；肝外胆管细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肝胆系统疾病史）
- 组织来源：肝外胆管组织段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展呈多边形，接触抑制后形成紧密连接结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖细胞密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（常规每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用试剂：0.25% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 操作方式：37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项
- 避免消化过度（损伤细胞极性及紧密连接）
- 传代后6小时内更换新鲜培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及低温保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：细胞角蛋白19（CK19）免疫荧光鉴定（P5代细胞应维持上皮特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 3日内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 复苏后存活率低于85%（台盼蓝染色结果）
- 物种鉴定与描述不符（需提供PCR检测证据）
- 不予重发情形
- 客户收货后超72小时未及时处理细胞
- 使用非指定培养基或未包被培养器皿
- 自行改良冻存液导致细胞损伤
- 未按规范进行细胞鉴定直接用于实验
