一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠肝星状细胞（Mouse Hepatic Stellate Cells）
细胞别称：HSC；肝星状细胞；肝脏间质细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肝脏病变史）
组织来源：肝脏组织非实质细胞分离
生长特性：贴壁生长（需特定基质包被培养器皿）
细胞形态：静息态呈脂滴富集状，活化后转为梭形或星状
细胞代数：P2 - P6（推荐使用前3代以维持静息表型）
细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1%双抗+肝星状细胞维持添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含7% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（静息态增殖缓慢，活化后加快）
供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准：细胞融合度达80% - 85%（静息态细胞增殖较慢）
传代比例：1:2至1:3（建议使用IV型胶原包被培养皿）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞悬浮
注意事项：
- 避免反复传代导致自发活化（推荐使用Retinol储存液）
- 消化后需立即加入含血清培养基终止反应
- 培养全程避光操作（防止视黄醇降解）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：专用无血清冻存液（含7% DMSO + 20% FBS + 渗透保护剂）
细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时进行α - SMA免疫荧光检测（静息态阳性率应＜10%）
- 功能验证：脂滴油红O染色（P3代细胞脂滴保有率需＞80%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供温度追踪报告）
2. 到货72小时内证实支原体污染（需提供检测原始数据）
3. 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）
4. 种属鉴定与承诺不符（STR检测报告）
不予重发情形：
1. 未使用推荐包被材料导致细胞异常活化
2. 培养环境中维生素A浓度超标引发表型改变
3. 消化时间超过10分钟造成机械损伤
4. 未按要求进行静息态维持（如使用TGF - β等活化因子）
