一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾小球内皮细胞(Mouse Glomerular Endothelial Cells)
细胞别称:MGEC;肾小球内皮细胞;肾脏内皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无肾脏疾病史)
组织来源:肾脏肾小球微血管段
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈梭形或多角形
细胞代数:P3 - P8(经功能验证的稳定代次)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:小鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+内皮生长因子复合物)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 60小时(与培养密度相关)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,离心后重悬接种
- 培养瓶:酒精消毒后直接置于37℃培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:3(建议初始密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 消化终止时添加含血清培养基中和酶活性
- 换液后12小时观察细胞贴壁状态
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)
细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(离心后重悬)
冻存步骤:
- 梯度降温程序:4℃平衡30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 存活率检测:台盼蓝染色法≥90%
- 功能验证:Ⅷ因子免疫荧光染色(P5代细胞阳性率>95%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(附检测报告)
3. 细胞复苏存活率<85%(经第三方验证)
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 解冻后培养超过48小时未换液
2. 使用非指定培养基或血清浓度
3. 自行修改冻存液成分导致结晶损伤
4. 未按要求进行预铺胶处理影响贴壁
(注:以上内容基于标准操作流程制定,具体实验条件需根据研究目的优化。)