一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠输尿管上皮细胞
- 细胞别称:输尿管上皮细胞;尿路上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:输尿管组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
- 细胞形态:多边形或立方状,形成连续紧密单层
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS+上皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含低浓度Ca²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应维持上皮特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 5天内证实支原体/真菌污染(需提供qPCR检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- 物种鉴定与宣传不符(需提供STR分析结果)
- 不予重发情形:
- 解冻后未及时接种导致细胞活性丧失
- 使用非推荐消化方法引起细胞膜损伤
- 未按要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 实验操作污染未及时反馈(超过7天)
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验条件需根据研究需求优化)