一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠膀胱基质成纤维细胞(Mouse Bladder Stromal Fibroblasts)
- 细胞别称:BSF;膀胱基质细胞;膀胱成纤维细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无膀胱疾病史)
- 组织来源:膀胱基质层(经酶消化法分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支撑)
- 细胞形态:典型长梭形或星状,融合后呈网状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞密度及培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基,接种至培养瓶。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置于培养箱内平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)。
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项
- 避免消化过度(防止细胞外基质蛋白降解)。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶,确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 转移至液氮长期储存。
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应维持基质合成功能)。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 收到后3天内证实微生物污染(需提供检测报告)。
- 复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色结果)。
- 细胞种属鉴定与描述不符(需提供STR比对报告)。
- 不予重发情形
- 收到后超过48小时未进行复苏操作。
- 使用非指定培养基或添加剂导致细胞状态异常。
- 未按规范进行细胞传代或冻存引发损伤。
- 实验操作污染后未及时反馈。