一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肾周细胞(Mouse Perirenal Cells)
- 细胞别称:肾周间质细胞;肾周脂肪细胞;肾周基质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾周脂肪组织或肾周结缔组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或星形,贴壁后呈成纤维细胞样单层排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(与培养密度及生长因子浓度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:酒精擦拭表面,置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 避免消化时间过长(防止细胞膜损伤)
- 传代后12小时观察贴壁情况,48小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透性保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:细胞增殖实验(P5代细胞应保持稳定增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 2. 收货7天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)
- 3. 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色照片)
- 4. 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形
- 1. 未按推荐方法保存或超时复苏(超过72小时)
- 2. 使用非指定培养基导致细胞状态异常
- 3. 自行反复冻融或不当操作引发细胞损伤
- 4. 未留存污染检测证据即进行后续实验