一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肾集合管上皮细胞。
- 细胞别称：mCCD细胞；肾集合管主细胞；皮质集合管上皮细胞。
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）。
- 年龄性别：健康成年鼠（性别均一化处理，供体无泌尿系统疾病史）。
- 组织来源：肾髓质集合管区显微分离。
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）。
- 细胞形态：单层铺路石样排列，极化生长呈现立方状或柱状。
- 细胞代数：P3 - P10（经跨膜电阻检测筛选功能稳定代次）。
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用保护液）。
- 培养基：肾上皮细胞专用培养基（含1% ITS+激素混合添加剂）。
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 平衡空气；温度：37℃；湿度：饱和湿度。
- 冻存条件：无动物源冻存液（含植物源冰晶抑制剂），液氮气相长期保存。
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖钠离子浓度调控）。
- 供应限制：仅用于基础研究，禁止体内移植或药物量产。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃解冻后离心去除冻存液，重悬于预温培养基。
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时。
- 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（紧密连接形成后需及时传代）。
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - 0.53mM EDTA溶液。
- 37℃消化3 - 5分钟，待细胞间隙扩大后轻柔拍打分散。
- 注意事项：
- 维持培养基渗透压280 - 310mOsm/kg（防止细胞空泡化）。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含7.5% DMSO+海藻糖复合物）。
- 细胞密度：最佳冻存浓度5×10⁵ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 消化后细胞经梯度离心去除消化酶。
- 程序降温：4℃预冷30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮储存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行活率检测（要求≥85%）。
- 功能验证：钠钾泵活性测定（P5代细胞需保持ENaC通道表达）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提交物流温度曲线）。
- 7日内证实真菌污染（需提供镜检图像与培养皿照片）。
- 细胞贴壁率低于80%（需提交接种24小时显微照片）。
- 水通道蛋白2免疫荧光标记缺失。
- 不予重发情形：
- 未使用指定胶原包被导致细胞脱落。
- 自行修改培养基电解质浓度引发功能异常。
- 未定期检测跨膜电阻值造成实验数据偏差。
- 超出规定代数继续使用导致功能衰退。
（注：所有操作需遵守II级生物安全规范，细胞特性描述基于批量质检报告，最终解释权归供方所有）
