一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠膀胱间质细胞(Mouse Bladder Stromal Cells)
细胞别称
MBSC;膀胱间质成纤维细胞;膀胱基质细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年小鼠(性别可选,品系可定制)
组织来源
膀胱间质层(经胶原酶消化分离)
生长特性
贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或星状,贴壁后呈网状铺展
细胞代数
P3 - P8(原代细胞经严格质控,确保功能稳定性)
细胞规格
5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
DMEM/F12(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+成纤维细胞生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含5% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 60小时(依赖细胞密度及培养条件)
供应限制
仅供体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(推荐每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 消化后需完全中和胰酶,避免残留影响细胞活性
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
专用无血清冻存液(含5% DMSO+10% FBS+抗氧化剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞特性
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 7日内经检测确认支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏后贴壁率低于60%(需提供明场及荧光染色图)
4. 品系鉴定与订单不符(STR或PCR验证)
不予重发情形
1. 未按推荐方法进行胶原包被导致细胞贴壁失败
2. 自行更改培养基成分引发细胞状态异常
3. 超低温保存设备故障导致反复冻融
4. 未执行无菌操作引发污染