一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠甲状腺成纤维细胞(Mouse Thyroid Fibroblasts)
细胞别称:MTF;甲状腺基质细胞;甲状腺结缔组织细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无甲状腺疾病史)
组织来源:甲状腺组织间质
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或不规则纺锤形,贴壁伸展后呈辐射状生长
细胞代数:P3 - P8(经严格筛选确保表型稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子补充剂)
培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含7% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(与血清批次及培养密度相关)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去除冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后静置培养箱1小时,待温度平衡后换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
- 避免消化液残留影响细胞贴壁(建议离心后重悬)
- 传代后12小时内避免移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含7% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ cells/mL(离心后细胞沉淀重悬)
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后程序降温
- 梯度冷冻:4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃过夜 → 转移液氮
复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥85%
- 功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7日内确认微生物污染(需提供染色法或PCR检测结果)
3. 复苏存活率低于80%(经第三方检测机构复核)
4. 种属鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 收货后未及时转移至液氮导致细胞活性丧失
2. 自行更改培养基配方影响细胞增殖
3. 实验操作污染导致交叉感染
4. 未按要求进行细胞身份认证即发表数据