小鼠成骨细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05135×10^5小鼠原代细胞3310


 一、细胞基本属性

- 细胞名称:小鼠成骨细胞(Mouse Osteoblasts)

- 细胞别称:成骨细胞;骨形成细胞

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无骨骼疾病史)

- 组织来源:骨髓或颅骨组织分离

- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)

- 细胞形态:贴壁后呈长梭形或多角形,融合后呈紧密单层排列

- 细胞代数:P3 - P8(维持成骨分化潜能与矿化功能)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:α - MEM培养基(含10% FBS+抗坏血酸+β -甘油磷酸钠)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与诱导条件)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验


 二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基

    - 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)

- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)

- 消化方法:

    - 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)

    - 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止

- 注意事项:

    - 消化后轻柔吹打避免损伤细胞膜

    - 首次换液需在贴壁后24小时内完成


 三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤:

    - 离心收集细胞后缓慢混合冻存液

    - 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存

- 复苏验证:

    - 复苏后48小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)

    - 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应保持成骨分化能力)


 四、售后服务承诺

- 重发标准:

    - 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)

    - 收到后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测结果)

    - 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)

    - 细胞特异性标志物(如Runx2)检测不符合标准

- 不予重发情形:

    - 未按推荐方法进行诱导分化导致功能异常

    - 使用非配套培养基或血清浓度超标

    - 解冻后未及时接种或反复冻融

    - 未定期检测细胞矿化功能即开展长期实验

- 注:本产品需配合成骨诱导试剂盒使用以获得最佳分化效果