一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠成骨细胞(Mouse Osteoblasts)
- 细胞别称:成骨细胞;骨形成细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无骨骼疾病史)
- 组织来源:骨髓或颅骨组织分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:贴壁后呈长梭形或多角形,融合后呈紧密单层排列
- 细胞代数:P3 - P8(维持成骨分化潜能与矿化功能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:α - MEM培养基(含10% FBS+抗坏血酸+β -甘油磷酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与诱导条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化后轻柔吹打避免损伤细胞膜
- 首次换液需在贴壁后24小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢混合冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应保持成骨分化能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测结果)
- 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 细胞特异性标志物(如Runx2)检测不符合标准
- 不予重发情形:
- 未按推荐方法进行诱导分化导致功能异常
- 使用非配套培养基或血清浓度超标
- 解冻后未及时接种或反复冻融
- 未定期检测细胞矿化功能即开展长期实验
- 注:本产品需配合成骨诱导试剂盒使用以获得最佳分化效果