一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠骨骼肌细胞(Mouse Skeletal Muscle Cells)
- 细胞别称:MSMC;骨骼肌成肌细胞;肌卫星细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肌肉病变史)
- 组织来源:后肢骨骼肌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或明胶包被培养器皿)
- 细胞形态:单核梭形或融合后多核肌管状,分化后呈现横纹结构
- 细胞代数:P3 - P8(保证分化潜能及遗传稳定性)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Skeletal Muscle Cell Medium(含15% FBS+成肌细胞生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(增殖期依赖生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁后直接置于37℃培养箱
- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(避免过度融合影响分化潜能)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至单细胞悬液
- 注意事项:
- 分化阶段需更换低血清诱导培养基
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低机械应力
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:MyoD1免疫荧光染色(P5代细胞应维持成肌分化标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 细胞活性低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 物种鉴定与承诺不符(STR检测报告)
- 不予重发情形:
- 超时复苏(收货后未在48小时内处理)
- 使用非推荐培养基或包被条件
- 未按分化操作指南导致肌管形成失败
- 实验前未进行支原体排查引发交叉污染
(注:所有操作需符合实验室生物安全规范,建议定期进行肌源性标志物检测以确保细胞特性。)