小鼠毛囊角质细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05285×10^5小鼠原代细胞4500


一、细胞基本属性 

细胞名称:小鼠毛囊角质细胞(Mouse Hair Follicle Keratinocytes) 

细胞别称:MFKC;毛囊上皮细胞;皮肤角质形成细胞 

种属来源:小鼠(Mus musculus) 

年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无皮肤病变史) 

组织来源:毛囊组织(分离自真皮-表皮交界处) 

生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿) 

细胞形态:典型多角形或扁平铺路石样,接触抑制后形成紧密单层 

细胞代数:P3 - P8(确保角质化相关基因稳定表达) 

细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液) 

培养基:Epilife培养基(含1%钙离子+角质细胞生长添加剂) 

培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95% 

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞特异性保护剂),液氮长期保存 

倍增时间:约48 - 72小时(与细胞分化状态相关) 

供应限制:仅用于基础研究,禁止临床或药物开发用途 


二、细胞培养操作指南 

收货处理:

冻存管需37℃水浴快速解冻后转移至预温培养基离心洗涤 

培养瓶收货后静置培养箱4小时再更换新鲜培养基 

传代标准:细胞融合度达80% - 85%(避免过度融合诱发分化) 

传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²) 

消化方法:

使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶) 

37℃消化3 - 5分钟,机械轻拍促进细胞脱落 

注意事项:

消化终止后需离心去除酶残留 

传代后12小时补充10ng/mL表皮生长因子 


三、细胞冻存操作规范 

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂) 

细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL 

冻存步骤:

细胞悬液分装至冻存管后立即进行程序降温 

推荐降温程序:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存 

复苏验证:

复苏后48小时检测角蛋白K14/K10表达(免疫荧光法) 

屏障功能验证:Trans - epithelial electrical resistance(TEER值≥200Ω·cm²) 


四、售后服务承诺 

重发标准:

1. 物流温度记录异常导致细胞失活

2. 到货7日内经qPCR证实支原体污染

3. 细胞角蛋白标志物表达缺失

4. STR分型与数据库不匹配

不予重发情形:

1. 未使用指定胶原包被培养器皿

2. 自行添加分化诱导剂导致细胞异常

3. 超过推荐代数(P8)继续传代

4. 未执行标准复苏流程直接实验