一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠毛囊干细胞（Mouse Hair Follicle Stem Cells）
- 细胞别称：HFSCs；毛囊干细胞；毛囊上皮干细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无皮肤病及免疫缺陷史）
- 组织来源：毛囊组织（分离自真皮乳头或毛囊隆突部）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：集落样生长，接触抑制后呈多边形或纺锤形
- 细胞代数：P3 - P8（维持干细胞干性及分化潜能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用干细胞培养基（含2% FBS + EGF + bFGF + ITS添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与培养密度及生长因子浓度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或转基因动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱1 - 2小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化1 - 2分钟，轻柔吹打至细胞脱离，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 避免消化时间过长（防止膜表面标志物丢失）
- 传代后12小时内避免移动培养瓶，确保贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS + 干细胞保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：干细胞标志物CD34/K15免疫荧光鉴定（P4代细胞应保持高表达率）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（经双方共同检测确认）
- 细胞分化标志物检测与说明书不符
- 不予重发情形
- 客户未按规范进行细胞复苏（如高温解冻或未及时接种）
- 自行更换培养基导致干性丧失（如使用高浓度血清诱导分化）
- 未定期检测支原体造成实验数据偏差
- 液氮保存不当导致细胞失活（需提供冻存记录）
