一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠皮下微血管内皮细胞(Mouse Subcutaneous Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称
MSC - MVEC;皮下微血管内皮细胞;真皮微血管内皮细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无皮肤或系统性疾病史)
组织来源
皮下组织微血管段
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被的培养基底)
细胞形态
单层铺展呈扁平多角形,接触抑制后形成连续镶嵌结构
细胞代数
P3 - P8(维持内皮细胞特异性标志物表达及屏障功能)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
小鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+血管内皮生长因子及肝素添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(与细胞密度及生长因子补充相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或活体动物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管接收后立即37℃水浴快速解冻,加入预热的完全培养基轻柔混匀离心;培养瓶收货时用75%酒精擦拭外表面,静置于培养箱1小时待温度平衡后观察状态。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%时传代(通常每3天需传代一次)。
传代比例
推荐1:2至1:3分种(初始接种密度建议为1×10⁴ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA),37℃消化30 - 60秒,显微镜下见细胞间隙增大后立即加入含血清培养基终止反应。
注意事项
避免消化时间过长导致细胞膜损伤;传代后6小时内避免移动培养瓶以确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO、20%胎牛血清及渗透保护剂)。
冻存密度
建议1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管并标记批次信息;采用程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
复苏验证
复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证包括CD31免疫荧光染色及体外血管形成实验(P5代细胞需保持成管能力)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度记录异常且细胞存活率<85%;
2. 到货72小时内经检测证实支原体污染;
3. 细胞STR鉴定与申报物种不一致;
4. 内皮标志物(如vWF、VE - cadherin)表达缺失。
免责条款
1. 客户未按规范进行预包被处理导致贴壁失败;
2. 使用非指定培养基或添加未经验证的细胞因子;
3. 细胞解冻后存放超过48小时未接种;
4. 实验操作污染导致细胞状态异常。