一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠骨骼肌微血管内皮细胞(Mouse Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称:MSkMEC;骨骼肌微血管内皮细胞;肌组织内皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成鼠(性别不限,供体筛选无骨骼肌病变史)
组织来源:骨骼肌组织微血管段
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈现规则多边形
细胞代数:P3 - P8(确保细胞功能稳定及遗传背景一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Mouse Endothelial Cell Medium(含5% FBS+内皮细胞特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(受细胞密度及基质涂层影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL预温培养基的离心管,1000rpm离心5分钟,弃上清后重悬接种。
培养瓶:酒精消毒表面后直接放入37℃培养箱,静置2小时待细胞贴壁。
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(通常每2 - 3天需传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止。
注意事项:消化全程轻摇培养瓶促进酶解均匀,重悬时避免剧烈吹打防止细胞膜损伤,传代后6小时需补足新鲜培养基。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含12% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:消化后离心收集细胞,冻存液重悬后分装至冻存管,程序降温盒 - 80℃过夜后转移至液氮气相层。
复苏验证:复苏后12小时进行活率检测(台盼蓝拒染率≥90%),48小时内完成CD31免疫荧光鉴定(阳性率>98%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温控异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 到货72小时内经qPCR证实微生物污染
3. 细胞活率低于承诺值(提供台盼蓝检测视频)
4. 基因背景与说明书不符(STR图谱比对差异>5%)
不予重发情形:
1. 未使用指定基质包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞功能异常
3. 解冻后未及时接种(延迟超4小时)
4. 未执行标准传代流程导致的细胞早衰
(注:以上内容基于小鼠骨骼肌微血管内皮细胞特性优化,实验操作需在生物安全二级实验室进行)