一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠耳软骨细胞
- 细胞别称：耳软骨细胞；耳廓软骨细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康小鼠（性别不限，供体筛选无耳部疾病史）
- 组织来源：耳软骨组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层贴壁时呈多角形或梭形，高密度时形成软骨基质结节
- 细胞代数：P3 - P8（确保软骨特异性表型及功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：软骨细胞专用培养基（含10% FBS+ITS添加剂+抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与传代密度及基质包被条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时适应环境。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
- 注意事项：
- 避免机械刮取损伤细胞外基质。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（需≥90%）。
- 功能验证：阿利新蓝染色检测蛋白多糖分泌能力（P5代细胞应维持基质合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）。
- 7天内证实细菌或真菌污染（需提供污染检测图像）。
- 细胞复苏活力低于85%（台盼蓝染色法）。
- 种属鉴定结果与描述不符（需提供STR检测报告）。
- 不予重发情形：
- 客户未在48小时内完成复苏操作。
- 使用非推荐消化酶导致细胞团块化。
- 未更换专用培养基引发细胞去分化。
- 未执行无菌操作造成人为污染。
