一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠单核细胞(Mouse Monocytes)
- 细胞别称:鼠源单核细胞;外周血单核细胞;骨髓源性单核细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无特定病原体感染史)
- 组织来源:外周血或骨髓单核细胞分离纯化
- 生长特性:悬浮或半贴壁生长(依赖细胞因子及培养条件)
- 细胞形态:圆形或类圆形,表面光滑,直径约10 - 20微米
- 细胞代数:原代细胞(P0 - P3代,建议传代次数不超过5代)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 单核细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞活化状态及培养体系)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,直接置于培养箱静置培养
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(悬浮培养)或贴壁细胞融合度达80%
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度5×10^4 cells/mL)
- 分离方法
- 密度梯度离心法(如Percoll分层)
- 磁珠分选法(CD11b或Ly6C标记)
- 注意事项
- 避免剧烈振荡或反复离心(防止细胞膜损伤)
- 添加细胞因子(如M - CSF)维持单核细胞存活与分化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:吞噬实验(荧光微球法)或趋化因子响应检测
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 48小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测结果)
- 细胞存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- 表面标志物鉴定与描述不符(需提供流式检测报告)
- 不予重发情形
- 未按规范分选或培养导致细胞分化
- 使用非推荐细胞因子或激活剂
- 未及时更换培养基引起细胞凋亡
- 未进行无菌操作导致污染扩散
(注:所有操作需符合生物安全规范,最终解释权归供应方所有)