一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠骨髓单核细胞(Mouse Bone Marrow Mononuclear Cells)
- 细胞别称:BMMNCs;骨髓单核细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无特定病原体感染史)
- 组织来源:骨髓组织(通过密度梯度离心法分离)
- 生长特性:悬浮生长(需依赖特定细胞因子支持)
- 细胞形态:不规则圆形或类圆形,边缘清晰
- 细胞代数:原代细胞(P0)或传代至P3(功能活性随代数增加可能降低)
- 细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+10 ng/mL M - CSF)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 增殖能力:依赖细胞因子刺激,原代细胞增殖活性有限
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 贴壁杂质处理:静置30分钟去除红细胞及碎片
- 传代标准:原代细胞建议直接使用,传代后功能活性可能降低
- 消化方法
- 悬浮细胞:无需消化,直接离心收集(300×g,5分钟)
- 贴壁杂质:可通过0.25%胰酶短暂处理去除
- 注意事项
- 避免反复离心(防止细胞机械损伤)
- 培养时需定期补充新鲜细胞因子(如M - CSF)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及右旋糖酐)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CD11b/CD14表面标志流式检测(原代细胞阳性率≥70%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
- 48小时内证实细菌/真菌污染(需提供显微图像及培养证据)
- 细胞活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
- 不予重发情形
- 客户未按推荐流程去除红细胞或贴壁杂质
- 使用非配套细胞因子导致活性丧失
- 冻存后未及时转移至液氮导致冰晶损伤
- 未进行表面标志鉴定直接用于实验
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验需结合文献优化条件。)