一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠脊髓微血管内皮细胞(Mouse Spinal Cord Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称:SCMEC;脊髓微血管内皮细胞;脊髓内皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源:脊髓组织微血管段
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展形态,接触抑制后呈现紧密镶嵌结构
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与基因稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:小鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+血管生成因子复合物)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 60小时(与接种密度及培养条件相关)
供应限制:仅限基础研究使用,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀;培养瓶经消毒后静置于培养箱1小时适应环境。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(常规培养周期为2 - 3天)
传代比例:1:2至1:4(建议初始密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:采用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应。
注意事项:控制消化时间以保护紧密连接蛋白;传代后6小时补充新鲜培养基。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞膜稳定剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心后重悬细胞,分装至冻存管,程序降温:4℃平衡20分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
复苏验证:复苏后12小时进行活力检测(存活率≥90%);功能验证包括CD31免疫荧光染色及跨内皮电阻测定(TEER值应符合文献标准)
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);2.到货48小时内证实微生物污染(需提交第三方检测报告);3.细胞复苏存活率低于承诺值;4.种属鉴定结果不符。
不予重发情形:1.未按操作指南进行复苏或培养;2.使用非指定培养基或试剂;3.细胞冻存管经历反复冻融;4.未在收到细胞后72小时内启动标准检测流程。