一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠海马神经元细胞
细胞别称：Hippocampal Neurons；Mouse Hippocampal Neuronal Cells
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：新生C57BL/6小鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
组织来源：脑组织海马区
生长特性：贴壁生长（需基质包被培养器皿）
细胞形态：典型神经元形态，具有轴突和树突分支
细胞代数：原代细胞（P0）或永生化细胞系（P5 - P15）
细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Neurobasal Medium（含2% B27添加剂+0.5mM谷氨酰胺）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及神经保护剂），-150℃以下长期保存
增殖能力：原代细胞不可增殖，永生化细胞系倍增时间约72小时
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；
培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时待细胞贴壁。
传代标准：永生化细胞系融合度达80% - 90%（原代细胞不建议传代）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25% Trypsin - EDTA（含DNase I预处理）；
37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞悬浮。
注意事项：
原代神经元需避免机械损伤，建议使用细胞筛过滤去除碎片；
换液时保留50%条件培养基以维持神经元活性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+神经生长因子）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤：
轻柔离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；
程序降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
复苏验证：
复苏后48小时检测神经元特异性标记物（β-III Tubulin阳性率≥90%）；
功能验证：钙离子成像检测电生理活性（P3代细胞应保持动作电位响应）。
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控截图）；
2. 7天内证实细菌/真菌污染（需提供培养污染图片及PCR报告）；
3. 神经元标记物阳性率低于80%（需提供免疫荧光检测结果）；
4. 基因型鉴定与宣传不符（需提供STR或特定基因位点测序报告）。
不予重发情形：
1. 永生化细胞传代超过P15代导致功能退化；
2. 未使用基质包被培养器皿影响细胞贴壁；
3. 原代细胞解冻后静置时间不足导致贴壁失败；
4. 未按规范添加神经营养因子导致突触退化。
