一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠神经胶质细胞(Mouse Neuroglial Cells)
- 细胞别称:胶质细胞;神经胶质;Glial Cells
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑组织(分离自大脑皮层或脊髓区域)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或聚赖氨酸包被培养器皿)
- 细胞形态:多态性特征(星形胶质细胞呈放射状突起,少突胶质细胞呈分支状,小胶质细胞呈阿米巴样)
- 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性和低代次遗传背景)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Neuroglia Culture Medium(含2%FBS + 胶质细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5%CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(星形胶质细胞增殖较缓慢)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后,离心去除冻存液,重悬于预热培养基;
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于37℃培养箱2小时稳定微环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(星形胶质细胞需控制传代频率以防过度增殖)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打终止反应。
- 注意事项:避免频繁传代导致小胶质细胞丢失;培养初期需添加抗生素预防污染;贴壁后更换无血清培养基可诱导分化。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO+10%胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶cells/mL(依据亚型调整)
- 冻存步骤:消化收集细胞,离心后重悬于冻存液;程序降温盒梯度冷冻:4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证:GFAP免疫荧光染色确认星形胶质细胞特性(P5代细胞阳性率≥95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);
- 2.7天内经检测证实支原体或真菌污染(需第三方检测报告);
- 3.细胞复苏后活力低于85%;
- 4.物种鉴定与描述不符(STR图谱验证)。
- 不予重发情形:
- 1.解冻后超72小时未进行贴壁培养;
- 2.使用非胶质细胞专用培养基导致功能异常;
- 3.未按规范进行包被处理引发细胞脱落;
- 4.实验操作污染导致交叉感染。