一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠神经干细胞(Mouse Neural Stem Cells)
细胞别称:NSCs;神经前体细胞;神经球细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:新生小鼠(性别不限,供体SPF级饲养环境)
组织来源:脑组织室管膜下区/海马区
生长特性:悬浮神经球或基质依赖性贴壁生长
细胞形态:透亮球形集落,边缘可见放射状突起
细胞代数:P3 - P5(维持干性标记物Nestin表达)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25低吸附培养瓶 或 1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:神经干细胞专用培养基(含20 ng/mL EGF + bFGF)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清程序降温冻存液(含5% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(与神经球大小相关)
供应限制:仅限基础研究,不可用于体内移植或疾病模型构建
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管复苏:37℃水浴解冻后接种基质胶包被培养器皿
悬浮培养:直接移入低吸附培养瓶,48小时内避免扰动
传代标准:
神经球直径达150 - 200μm(通常培养5 - 7天)
传代方法:
机械法:轻柔吹打分解神经球至单细胞悬液
酶解法:使用Accutase 37℃消化8 - 10分钟
接种密度:
悬浮培养按2×10⁴ cells/mL,贴壁培养按1×10⁴ cells/cm²
注意事项:
维持培养基神经营养因子浓度(每3天半量换液)
避免频繁观察引起的温度波动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:
无血清冻存液(含7.5% DMSO + 海藻糖保护剂)
细胞处理:
收集神经球经300g离心5分钟,保留直径<100μm的神经球
冻存步骤:
细胞悬液与冻存液按1:1混合
程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冻存盒过夜→液氮储存
质量检测:
复苏后神经球形成率≥70%(培养72小时评估)
多能性验证:免疫荧光检测Sox2阳性率>90%
四、售后服务承诺
质量保证:
到货72小时内提供活力检测报告(Calcein - AM染色≥85%)
批次记录包含神经球形成效率数据
支原体检测阴性证明随货附送
重发条款:
干冰运输异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
到货7日内证实细胞分化异常(需提供标记物检测图)
免责声明:
使用含血清培养基导致自发分化
机械传代力度不当造成细胞损伤
未按要求进行基质包被影响贴壁生长
超过建议代数导致干性标记丢失