一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠脊髓成纤维细胞（Mouse Spinal Cord Fibroblasts）
- 细胞别称：MSCF；脊髓成纤维细胞；脊髓基质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，无脊髓损伤或神经疾病史）
- 组织来源：脊髓组织（经酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被的培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，单层贴壁后呈平行排列或网状结构
- 细胞代数：P3 - P10（经严格筛选确保表型稳定性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS + 1%成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约36 - 60小时（与接种密度及血清浓度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察到细胞间隙扩大后终止
- 注意事项：
- 避免机械刮取（易导致细胞碎片残留）
- 传代后12小时内避免频繁观察（减少环境扰动）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于冻存液，分装至标记冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞需维持典型成纤维细胞表型）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录凭证）
- 7日内经PCR证实支原体或真菌污染
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供清晰显微照片）
- 细胞种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行胶原包被导致贴壁失败
- 自行更换培养基成分引发细胞分化异常
- 多次冻融操作或未使用程序降温设备
- 未在传代后48小时内反馈问题
