一、细胞基本属性:
- 细胞名称:小鼠角膜上皮细胞(Mouse Corneal Epithelial Cells)
- 细胞别称:MCEpiC;角膜上皮细胞;眼表上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:角膜上皮层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白涂层培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈紧密镶嵌结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保细胞功能活性与增殖潜能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Growth Medium(含1% FBS+角膜特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无动物源冻存液(含5% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(受细胞密度及培养环境影响)
- 供应限制:仅供基础研究使用,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南:
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒外壁后置于CO₂培养箱静置4小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)。
- 37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 消化全程需轻柔震荡避免机械损伤。
- 传代后12小时内避免移动培养器皿。
三、细胞冻存操作规范:
- 冻存液配方:无血清角膜专用冻存液(含5% DMSO+抗氧化剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心去上清,缓慢滴加预冷冻存液。
- 程序降温:4℃平衡20分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后活率检测:AO/PI双染法(活率≥85%)。
- 功能验证:划痕实验检测P3代细胞迁移能力。
四、售后服务承诺:
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)。
- 到货72小时内经qPCR证实微生物污染。
- 细胞贴壁率低于80%(需提供明场显微照片)。
- 物种鉴定结果与申报不符。
- 不予重发情形:
- 未使用配套基质胶进行培养。
- 自行修改培养基配方导致形态异常。
- 未按规范进行细胞传代(如机械刮除法替代酶消化)。
- 收货后超48小时未进行首次换液