一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠视网膜色素上皮细胞(Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells)
- 细胞别称:mRPE;视网膜色素上皮细胞;RPE细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:视网膜色素上皮层
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质涂层)
- 细胞形态:扁平多角形,单层紧密排列,可见色素颗粒
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和分化潜能)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPE专用培养基(含1% FBS +色素上皮生长因子及抗氧化剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖培养密度及基质类型)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取(易损伤基底膜结构)
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少光毒性影响
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:吞噬功能检测(P5代细胞应保持光感受器外节吞噬活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 5天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微图像)
- 物种鉴定与宣传不符(需提供STR比对结果)
- 不予重发情形:
- 未在48小时内完成细胞复苏操作
- 使用非配套培养基导致色素脱失
- 擅自修改冻存液配方引发细胞损伤
- 未按规范进行光保护处理导致细胞光敏性死亡
(以上内容基于标准操作流程,具体实验需结合文献优化条件)