小鼠视网膜色素上皮细胞

小鼠原代细胞

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5×10^55×10^5小鼠原代细胞4520



一、细胞基本属性

- 细胞名称:小鼠视网膜色素上皮细胞(Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells)

- 细胞别称:mRPE;视网膜色素上皮细胞;RPE细胞

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)

- 组织来源:视网膜色素上皮层

- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质涂层)

- 细胞形态:扁平多角形,单层紧密排列,可见色素颗粒

- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和分化潜能)

- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:RPE专用培养基(含1% FBS +色素上皮生长因子及抗氧化剂)

- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖培养密度及基质类型)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀

    - 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置于培养箱平衡1小时

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)

- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)

- 消化方法:

    - 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)

    - 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止

- 注意事项:

    - 避免机械刮取(易损伤基底膜结构)

    - 传代后48小时内避免频繁观察,减少光毒性影响


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO及糖原保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤:

    - 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液

    - 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存

- 复苏验证:

    - 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)

    - 功能验证:吞噬功能检测(P5代细胞应保持光感受器外节吞噬活性)


四、售后服务承诺

- 重发标准:

    - 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)

    - 5天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)

    - 细胞贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微图像)

    - 物种鉴定与宣传不符(需提供STR比对结果)

- 不予重发情形:

    - 未在48小时内完成细胞复苏操作

    - 使用非配套培养基导致色素脱失

    - 擅自修改冻存液配方引发细胞损伤

    - 未按规范进行光保护处理导致细胞光敏性死亡


(以上内容基于标准操作流程,具体实验需结合文献优化条件)