一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠晶状体上皮细胞(Mouse Lens Epithelial Cells)
细胞别称:MLEC;晶状体上皮细胞;晶状体前囊上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经眼科病理学筛选无晶状体病变)
组织来源:晶状体前囊上皮层
生长特性:贴壁生长(需包被纤维连接蛋白或层粘连蛋白基质)
细胞形态:单层铺展呈扁平多边形,接触抑制后呈规则六边形镶嵌排列
细胞代数:P3 - P6(维持晶状体特异性标志物表达及上皮 - 间充质转化抑制特性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:晶状体上皮细胞专用培养基(含5% FBS+表皮生长因子+抗氧化剂复合物)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及低温保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:约60 - 84小时(与细胞密度及基质包被条件相关)
供应限制:仅用于基础研究,不可应用于临床治疗或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴震荡解冻后,立即加入3mL预温培养基低速离心去冻存液
- 培养瓶:表面酒精消毒后静置于培养箱30分钟平衡温湿度
传代标准:细胞融合度达80% - 85%(正常培养周期为4 - 5天)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 采用0.02% EDTA - 胰酶复合消化液(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化3 - 4分钟,镜下观察到细胞间隙增大后轻柔拍打瓶壁终止
注意事项:
- 禁止机械刮除法传代(保护细胞基底膜完整性)
- 首次换液需在接种后6小时内完成(清除残余消化酶)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物源冻存液(含8% DMSO+海藻糖低温保护体系)
细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化收集细胞后200×g离心5分钟,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时内进行活率检测(台盼蓝拒染率≥90%)
- 功能验证:α - 晶状体蛋白免疫荧光染色(P4代细胞应保持特征性表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录仪显示超温事件(需提供全程温控曲线)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提交第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于承诺标准(双盲法台盼蓝复检确认)
4. 种属鉴定与申报不符(STR图谱比对差异≥3个位点)
不予重发情形:
1. 超时复苏(到货后未在48小时内处理)
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 未使用推荐包被基质引发上皮 - 间充质转化
4. 未执行定期支原体监测造成交叉污染
(注:本产品严格遵循国际细胞培养标准,所有批次均提供STR鉴定报告及三代内无菌检测证明)