一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠脉络膜微血管内皮细胞（Mouse Choroidal Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：MCMEC；脉络膜血管内皮细胞；眼微血管内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：脉络膜组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展呈多角形，接触抑制后形成紧密连接结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和基因表达一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：小鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS+血管内皮生长因子及肝素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与培养密度及基质包被条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至含5mL预热培养基的离心管，离心去冻存液后重悬接种。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，置于37℃培养箱静置2小时后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度为4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液，37℃消化1 - 1.5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项：避免消化时间过长导致细胞膜损伤；传代后12小时内避免频繁观察扰动贴壁过程。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后24小时进行活率检测（台盼蓝染色法，存活率≥90%）；功能验证包括CD31免疫荧光染色及血管形成实验（P5代细胞需保持成管能力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控报告）；
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）；
- 细胞活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）；
- 物种鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形
- 细胞到货后超过5天未进行复苏操作；
- 使用非指定培养基或未进行基质包被导致细胞脱落；
- 自行修改冻存液配方或冻存程序引发细胞损伤；
- 未按规范进行无菌操作造成污染。
