一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠牙髓干细胞(Mouse Dental Pulp Stem Cells)
细胞别称:mDPSC;牙髓间充质干细胞;牙髓祖细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源:牙髓组织(第三磨牙或切牙牙髓腔)
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或多角形,增殖期呈旋涡状排列
细胞代数:P3 - P10(保持干细胞特性与分化潜能)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%双抗+成纤维生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(受细胞密度及生长因子影响)
供应限制:仅供科学研究,不可用于临床治疗或人体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管需在37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶经酒精消毒后静置于培养箱1小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性及表面标志物)
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶以确保贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P5代细胞需保持多向分化潜能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中液氮罐泄露或温度异常(需提供物流凭证)
2. 到货72小时内经检测证实微生物污染(需提供污染检测结果)
3. 细胞复苏后活性低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
4. 表面标志物CD90/CD105阳性率未达标准(流式检测报告)
不予重发情形:
1. 未按规范进行预包被直接接种导致贴壁失败
2. 使用含高浓度血清(>15%)培养基引发分化异常
3. 未定期检测支原体造成后续实验污染
4. 细胞传代超过P10代后功能衰退
(注:以上内容均基于标准操作流程,实际应用需结合具体实验条件优化参数。)