一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠牙龈成纤维细胞(Mouse Gingival Fibroblasts)
- 细胞别称:MGF;牙龈成纤维细胞;口腔成纤维细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
- 组织来源:牙龈组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,融合后呈网状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和增殖活性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与接种密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后,静置于培养箱内2小时以平衡环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项:避免消化时间过长(可能损伤细胞膜完整性);传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞特异性保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,按梯度降温程序操作:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%);功能验证采用胶原分泌能力检测(P5代细胞应维持正常分泌功能)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 收货后3天内证实微生物污染(需提供检测报告)。
- 复苏后存活率低于85%(按规范操作验证)。
- 细胞种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形:
- 未在48小时内进行复苏操作。
- 使用非指定培养基或血清导致细胞异常。
- 反复冻融或机械损伤造成的细胞死亡。
- 未按标准流程进行污染排查直接开展实验。