一、细胞基本属性
细胞名称：BRL-3A大鼠肝细胞（Buffalo Rat Liver 3A Cells）
细胞别称：大鼠肝上皮细胞；BRL3A细胞系
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康新生大鼠（性别混合，供体筛选无肝脏病变史）
组织来源：肝脏组织
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：单层铺展呈多角形，接触抑制后排列紧密
细胞代数：P4 - P10（推荐使用代数以确保代谢活性稳定）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO+细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约24 - 36小时（依赖培养密度与营养条件）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶：表面消毒后静置培养箱1小时，待细胞贴壁后换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
• 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项：
• 消化完成后轻柔吹打避免机械损伤
• 换液时保留部分原培养基以维持细胞分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
• 离心收集细胞，缓慢加入预冷冻存液混匀
• 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
• 复苏后48小时内检测贴壁率（应≥85%）
• 功能验证：白蛋白分泌检测（P5代细胞维持基础合成功能）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
2. 72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供显微图像记录）
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形：
1. 未按规范进行预包被处理导致贴壁失败
2. 自行更改培养基配方影响细胞状态
3. 反复离心或冻存操作不当
4. 未按要求进行周期性支原体检测
（注：所有操作需遵守生物安全规范，细胞特性可能因培养条件存在批次间差异，建议定期进行功能验证。）
