一、细胞基本属性
细胞名称
RBL-2H3大鼠嗜碱性白血病细胞
细胞别称
Rat Basophilic Leukemia Cells;RBL - 2H3细胞系
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
组织来源
嗜碱性白血病细胞(源自肥大细胞瘤模型)
生长特性
贴壁生长(需经胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则多边形或梭形,贴壁伸展后可见颗粒状胞质
细胞代数
P5 - P15(推荐使用代数,确保功能稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
MEM培养基(含15% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%非必需氨基酸)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(依赖培养密度及血清批次)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免剧烈吹打(防止颗粒内容物提前释放)
传代后12小时观察贴壁情况,及时补加培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
梯度降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→转入液氮
复苏验证
复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:β - 己糖胺酶释放检测(P8代细胞应保持过敏反应活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞存活率低于85%(经第三方检测确认)
4. 细胞STR谱系与数据库不匹配
不予重发情形
1. 客户未按推荐条件进行胶原包被导致贴壁失败
2. 使用非标准培养基(如FBS浓度低于10%)
3. 反复离心操作导致颗粒内容物提前释放
4. 未进行功能验证直接用于药物筛选实验