一、细胞基本属性
- 细胞名称:CFSC - 8B大鼠肝星形细胞
- 细胞别称:大鼠肝星状细胞;肝纤维化模型细胞;Hepatic Stellate Cells
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年雄性SD大鼠(供体经肝纤维化模型诱导)
- 组织来源:肝纤维化模型大鼠肝组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:活化状态下呈纺锤形或星状,胞内可见脂滴
- 细胞代数:P5 - P10(确保功能活性与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+肝星形细胞活化因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与活化状态及培养条件相关)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置培养箱1小时适应
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项
- 避免长时间消化(防止细胞过度活化)
- 传代后12小时内补充2 ng/mL TGF - β以维持表型
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时检测细胞活性(存活率≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P6代细胞应维持活化特征)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 5天内证实支原体污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏后活性低于85%(台盼蓝染色验证)
- 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形
- 未按规范进行胶原包被导致细胞贴壁失败
- 擅自使用无TGF - β培养基引发表型逆转
- 反复冻存或长时间常温暴露操作
- 未执行标准活化因子添加程序