一、细胞基本属性
- 细胞名称
CTX大鼠脑星形胶质细胞(CTX Rat Brain Astrocytes)
- 细胞别称
星形胶质细胞;脑胶质细胞;原代星形胶质细胞
- 种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别
新生SD大鼠(1 - 3日龄,性别不限)
- 组织来源
大脑皮层组织分离培养
- 生长特性
贴壁生长(依赖多聚赖氨酸或胶原包被)
- 细胞形态
典型星形多突状,胞体扁平,突起交织成网
- 细胞代数
原代细胞(P0)或传代细胞(P1 - P3,建议使用低传代次)
- 细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基
DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清+2mM谷氨酰胺+1%双抗)
- 培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件
无血清冻存液(含8% DMSO+20% FBS),-150℃以下长期保存
- 倍增时间
约96 - 120小时(原代细胞增殖能力有限)
- 供应限制
仅限体外研究使用,不可用于体内实验或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预温培养基;
- 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱4小时适应。
- 传代标准
细胞融合度达90% - 95%(原代细胞建议每5 - 7天传代)
- 传代比例
1:1至1:2(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA,37℃消化3 - 5分钟,加入含血清培养基终止反应。
- 注意事项
- 避免频繁传代(防止去分化);
- 培养期间需定期添加bFGF维持细胞活性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方
基础培养基+20% FBS+8% DMSO+1%葡萄糖
- 细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
离心后重悬于冻存液,梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
存活率≥85%(台盼蓝染色);免疫荧光检测GFAP阳性率≥95%。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 细胞复苏后48小时内活力低于80%(需提供染色照片);
- 2. 支原体污染(需提供检测报告);
- 3. GFAP免疫荧光鉴定阴性。
- 不予重发情形
- 1. 使用非推荐包被材料导致细胞贴壁失败;
- 2. 未按规范添加生长因子致细胞老化;
- 3. 超过建议传代次数后出现功能异常;
- 4. 液氮罐保存不当导致冻存管破裂。