一、细胞基本属性
细胞名称:H4-II-E-C3大鼠肝癌细胞
细胞别称:H4细胞;H4肝癌细胞;H4 hepatoma cells
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
背景来源:化学诱导的大鼠肝癌组织
组织来源:肝脏肿瘤组织
生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,呈不规则多角形或梭形
细胞代数:推荐使用P3 - P10代(维持肿瘤特性稳定)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与培养条件及传代密度相关)
应用领域:肝癌机制研究、药物筛选、肿瘤侵袭转移模型构建
供应限制:仅限于科学研究,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面,置于37℃培养箱静置4小时再换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
贴壁能力较弱,建议使用胶原或明胶预包被培养皿
传代后需24小时内更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
细胞密度:推荐冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
消化离心后重悬细胞于冻存液
程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:AFP分泌检测或CCK - 8增殖能力测定(P5代内)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内检测出支原体污染(需提供第三方报告)
3. STR分型与数据库记录不符
4. 复苏后存活率低于承诺值(经双方复测确认)
不予重发情形:
1. 未按规范进行胶原包被导致贴壁失败
2. 使用非推荐培养基或血清批次
3. 细胞冻存后未经程序降温直接置于 - 80℃
4. 未定期进行支原体检测引发实验室污染