一、细胞基本属性
细胞名称:IEC - 18大鼠回肠细胞
细胞别称:大鼠回肠隐窝上皮细胞;回肠上皮细胞系
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无肠道疾病史)
组织来源:回肠隐窝组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞间连接与基质附着)
细胞形态:单层铺展生长,呈不规则多边形或梭形,核质比适中
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12培养基(补充10%胎牛血清+1%胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与培养基组分及接种密度相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:
- 消化终止时需加入等体积含血清培养基中和
- 传代后12小时建议全量换液以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+葡萄糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后重悬细胞于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃ 12小时→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P8代细胞应保持隐窝上皮特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供染色检测证据)
3. 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色照片)
4. 种属鉴定与申报不符
不予重发情形:
1. 未按规范进行细胞复苏(如高温解冻或延迟处理)
2. 擅自更改培养基配方导致细胞形态异常
3. 未使用推荐传代方法引起细胞分化
4. 未执行定期支原体检测造成交叉污染