一、细胞基本属性
- 细胞名称：人胆囊上皮细胞永生化（Human Gallbladder Epithelial Cells Immortalized）
- 细胞别称：HGBEpC - Im；胆囊上皮细胞；永生化胆囊细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝胆系统疾病史）
- 组织来源：胆囊黏膜上皮组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数：P10 - P15（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：胆囊上皮细胞专用培养基（含1% FBS+上皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞冻存保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（贴壁稳定后增殖速率提升）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗、药物生产或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免机械刮取（损伤细胞基底面整合素）
- 首次传代后12小时内补充5ng/mL EGF增强贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃ 12h → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：ZO - 1免疫荧光染色（P10代细胞应保持紧密连接完整性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 5天内证实微生物污染（需提供qPCR检测结果）
- 复苏后细胞存活率低于85%（台盼蓝染色复检确认）
- 永生化标记基因检测与申报不符
- 不予重发情形
- 客户超时复苏（＞48小时）或解冻操作不当
- 自行更换培养基导致细胞分化或功能丧失
- 未按要求进行胶原包直接接种引发脱落
- 未执行定期支原体检测造成交叉污染
