一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠骨髓间充质干细胞永生化（Immortalized Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells）
- 细胞别称：iBM - MSCs；永生化骨髓基质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体经病原检测合格）
- 组织来源：骨髓腔（经密度梯度离心法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或成纤维样，高核质比，可形成均匀单层
- 细胞代数：P5 - P15（经SV40 T抗原转导稳定传代）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：α - MEM基础培养基（含10% FBS+1%双抗+4mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（依赖细胞密度及传代状态）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶-EDTA（含1mM EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 传代后6小时内避免扰动以促进贴壁
- 定期检测多向分化潜能（成骨/成脂诱导验证）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：流式检测CD29/CD44阳性率＞95%，CD45阴性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常（需提供温度记录仪数据）
- 7天内证实支原体污染（需提供PCR检测报告）
- 细胞活率低于85%（经第三方检测确认）
- 永生化标志物（SV40 T抗原）表达缺失
- 不予重发情形：
- 未使用推荐包被条件导致贴壁失败
- 自行修改培养基配方引发细胞分化
- 未按规范进行无菌操作导致污染
- 超过推荐代数（P15）后功能异常
