小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化

原代细胞永生化

货号

规格

产品分类

目录价

XM-X07011×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

细胞名称:永生化小鼠肺动脉平滑肌细胞

细胞别称:iPASMC;小鼠肺动脉平滑肌细胞;PASMC永生化株

种属来源:小鼠(Mus musculus)

年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无心血管疾病遗传背景)

组织来源:肺动脉中膜平滑肌层

生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:长梭形,平行排列呈束状,接触抑制后呈现典型“峰谷”结构

细胞代数:P5 - P15(经SV40 Large T抗原永生化处理,增殖稳定)

细胞规格:5×10^5 cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管(含特异性冻存液)

培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+PDGF - BB生长因子)

培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),-150℃以下长期保存

倍增时间:约24 - 36小时(依赖生长因子浓度及传代密度)

供应限制:仅限基础研究使用,不可用于临床或体内实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)

传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)

37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离

注意事项:

消化后需用含血清培养基充分中和

传代后12小时补充新鲜生长因子


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)

细胞密度:冻存浓度5×10^5 - 1×10^6 cells/mL

冻存步骤:

消化离心后缓慢滴加冻存液混匀

程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存

复苏验证:

复苏后48小时检测α - SMA表达(免疫荧光染色≥90%)

功能验证:钙离子荧光探针检测收缩响应能力


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 物流过程温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)

2. 7日内经qPCR证实支原体污染

3. 细胞贴壁率低于85%(复苏后72小时评估)

4. 永生化标志物SV40 T抗原检测阴性

不予重发情形:

1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落

2. 自行更改培养基成分影响细胞表型

3. 连续培养超过P15代出现衰老特征

4. 未按规范进行肌源性标志物鉴定即发表数据

(注:本产品需配合纤连蛋白包被培养器皿使用,建议传代前预铺Ⅰ型胶原)