一、细胞基本属性
细胞名称:永生化小鼠肺动脉平滑肌细胞
细胞别称:iPASMC;小鼠肺动脉平滑肌细胞;PASMC永生化株
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无心血管疾病遗传背景)
组织来源:肺动脉中膜平滑肌层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形,平行排列呈束状,接触抑制后呈现典型“峰谷”结构
细胞代数:P5 - P15(经SV40 Large T抗原永生化处理,增殖稳定)
细胞规格:5×10^5 cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管(含特异性冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+PDGF - BB生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(依赖生长因子浓度及传代密度)
供应限制:仅限基础研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项:
消化后需用含血清培养基充分中和
传代后12小时补充新鲜生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤:
消化离心后缓慢滴加冻存液混匀
程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测α - SMA表达(免疫荧光染色≥90%)
功能验证:钙离子荧光探针检测收缩响应能力
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流过程温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 7日内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞贴壁率低于85%(复苏后72小时评估)
4. 永生化标志物SV40 T抗原检测阴性
不予重发情形:
1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落
2. 自行更改培养基成分影响细胞表型
3. 连续培养超过P15代出现衰老特征
4. 未按规范进行肌源性标志物鉴定即发表数据
(注:本产品需配合纤连蛋白包被培养器皿使用,建议传代前预铺Ⅰ型胶原)