一、细胞基本属性
- 细胞名称：猫主动脉内皮细胞永生化（Immortalized Feline Aortic Endothelial Cells）
- 细胞别称：iFAEC；主动脉内皮细胞永生化株
- 种属来源：猫（Felis catus）
- 年龄性别：健康成年猫（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：主动脉血管段（经永生化处理）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型单层铺路石样排列，接触抑制后呈梭形或多角形
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
- 培养基：专用内皮细胞培养基（含5% FBS + 内皮生长因子复合物）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及低温保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与培养密度及传代次数相关）
- 供应限制：仅限体外研究使用，禁止临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，加入预热培养基低速离心后重悬接种；培养瓶经酒精擦拭外壁，静置培养箱1小时后补充新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%时进行传代（建议每2 - 3天观察一次）。
- 传代比例：推荐1:3分盘（接种密度4×10³ cells/cm²为宜）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化1.5 - 2分钟，显微镜下确认细胞边缘回缩后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项：避免消化时间过长导致紧密连接破坏，传代后12小时内需更换培养基清除残余酶类。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂）。
- 细胞密度：冻存浓度建议1.5×10⁶ cells/mL（离心后重悬体积精确控制）。
- 冻存步骤：梯度降温程序：4℃平衡30分钟，-20℃预冷2小时，-80℃过夜后转入气相液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后48小时内完成：台盼蓝染色存活率≥90%，Ⅷ因子免疫荧光鉴定内皮特性，划痕实验验证迁移能力（P8代细胞应保持永生化特性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常且复苏后活率＜85%（需提供温度监控记录）
- 7日内经PCR证实支原体污染（需提供电泳检测图）
- 永生化标志物（如SV40大T抗原）检测阴性
- 细胞STR图谱与备案数据不符
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 擅自更改培养基配方影响细胞特性
- 液氮保存中断超过48小时
- 未按要求进行定期传代导致衰老
本产品经永生化处理（SV40大T抗原转染），保留内皮细胞特异性标志物（CD31/vWF阳性），适用于血管屏障功能研究、药物跨膜转运实验及炎症反应模型构建，配套提供细胞鉴定报告及操作视频指导。
