一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肠间质细胞永生化（Immortalized Mouse Intestinal Stromal Cells）
- 细胞别称：永生化肠间质细胞；IMSC；肠道间质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：肠道组织间质层（分离自小肠或结肠固有层）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
- 细胞形态：成纤维样梭形或多角形，融合后呈网状排列
- 细胞代数：P3 - P15（经永生化处理，具备稳定增殖能力）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用间质细胞培养基（含10% FBS +成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养密度与生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时恢复
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项
- 避免机械刮取（防止细胞膜损伤）
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO +海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 24h → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：EdU增殖检测（P8代细胞应保持稳定增殖活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5天内证实支原体污染（需提供荧光PCR检测结果）
- 细胞复苏存活率低于85%
- 永生化标志物检测不达标（如SV40 T抗原表达缺失）
- 不予重发情形
- 未按规范进行预包被直接接种细胞
- 使用非推荐消化酶导致细胞团块化
- 未定期进行支原体预防性处理
- 细胞传代超过P15代次后功能异常
