人支气管平滑肌细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X07081×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人支气管平滑肌细胞永生化(Immortalized Human Bronchial Smooth Muscle Cells)

- 细胞别称:HBSC - SM;支气管平滑肌细胞;永生化气道平滑肌细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无呼吸道疾病史)

- 组织来源:支气管组织平滑肌层

- 生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质)

- 细胞形态:长梭形,平行排列成束状,融合后呈典型“峰谷”样结构

- 细胞代数:P10 - P20(经永生化处理,增殖能力稳定)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)

- 培养基:Smooth Muscle Cell Growth Medium(含5% FBS+平滑肌特异性生长因子)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:~24 - 48小时(永生化特性保障稳定增殖)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心去冻存液后重悬接种

    - 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱2小时平衡后换液

- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(推荐传代周期2 - 3天)

- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)

- 消化方法:

    - 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶辅助消化)

    - 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞脱落后终止

- 注意事项:

    - 避免机械吹打损伤细胞骨架(影响收缩功能)

    - 传代后48小时内检测α - SMA标志物表达以确认表型


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤:

    - 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液

    - 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存

- 复苏验证:

    - 复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色≥90%)

    - 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩响应(P15代内维持功能)


四、售后服务承诺

- 重发标准:

    - 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)

    - 7日内确认支原体污染(需提供第三方检测报告)

    - 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)

    - 基因稳定性检测与说明书不符(需提供STR比对结果)

- 不予重发情形:

    - 解冻后超72小时未进行接种操作

    - 自行更换培养基导致细胞表型丢失

    - 未按规范进行无菌操作引发污染

    - 实验操作不当导致细胞功能异常


注:本产品经SV40大T抗原永生化处理,适用于气道重塑、哮喘机制等研究,建议配合专用基质胶使用以维持细胞收缩特性。