一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠卵巢颗粒细胞永生化
细胞别称：永生化卵巢颗粒细胞；小鼠卵巢GC细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康雌性小鼠（供体筛选无卵巢疾病史）
组织来源：卵巢组织颗粒细胞层
生长特性：贴壁生长（依赖特定细胞外基质）
细胞形态：多边形上皮样，单层铺展后呈铺路石样排列
细胞代数：P10 - P20（经永生化处理，保持稳定增殖特性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+2mM谷氨酰胺+1% ITS+10ng/mL FSH）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（与激素刺激相关）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后，离心去除冻存液，重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时平衡微环境
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍瓶壁促使脱落，立即加入含血清培养基终止
注意事项：
- 严格控制消化时间（避免细胞膜损伤）
- 传代后12小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基）
细胞密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心收集细胞，预冷冻存液重悬
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：孕酮分泌实验（P10代细胞需维持激素响应性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度曲线）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测影像）
3. 细胞活率低于85%（经第三方检测确认）
4. 永生化标记基因PCR验证未通过
不予重发情形：
1. 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
2. 未按规范进行细胞复苏（如直接室温解冻）
3. 实验操作污染导致细胞状态异常
4. 未在P20代以内完成关键实验
（注：本产品通过SV40大T抗原转染实现永生化，保留原代颗粒细胞类固醇合成功能，适用于卵巢生理及生殖毒理研究。）
