一、细胞基本属性
- 细胞名称：猪脂肪干细胞永生化（Immortalized Porcine Adipose - Derived Stem Cells）
- 细胞别称：iPADSC；永生化脂肪间充质干细胞
- 种属来源：猪（Sus scrofa domesticus）
- 年龄性别：健康成年猪（性别不限，供体经筛选无代谢性疾病史）
- 组织来源：脂肪组织（皮下或内脏脂肪微环境分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质，永生化后保持稳定增殖能力）
- 细胞形态：长梭形或成纤维样，单层贴壁后呈均一纺锤状
- 细胞代数：P10 - P20（经永生化处理，遗传稳定性及增殖能力显著提升）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Mesenchymal Stem Cell Medium（含10% FBS+成脂/成骨分化添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（永生化后增殖速率显著提升）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含酚红指示剂）
- 37℃消化30 - 60秒，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性及分化潜能）
- 传代后12小时内更换培养基以去除残余酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃ 12h → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
- 功能验证：成脂诱导分化实验（P10代细胞需保持多向分化潜能）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5日内证实微生物污染（需提供qPCR检测结果）
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 核型分析显示非猪源性污染
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致分化异常
- 多次冻融操作造成细胞损伤
- 未按规范进行无菌操作引发污染
