一、细胞基本属性
细胞名称：鸭胚肝间质细胞永生化株（Immortalized Duck Embryonic Liver Stromal Cells）
细胞别称：永生化鸭胚肝间质细胞；鸭肝基质细胞系
种属来源：家鸭（Anas platyrhynchos domesticus）
发育阶段：胚胎期（胚龄12 - 14天）
组织来源：胚胎肝脏间质组织
生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态：长梭形或星状，接触抑制后呈网状排列
细胞代数：P15 - P25（经SV40大T抗原转染稳定传代）
细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10%胎牛血清+1%非必需氨基酸+0.1% β - 巯基乙醇）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：38.5℃（禽类最适温度）；湿度：95%
冻存条件：禽类专用无血清冻存液（含8% DMSO及渗透调节剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（依赖血清批次及包被基质）
供应限制：仅限基础研究使用，不可用于禽类疫苗生产或转基因研究
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：38.5℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准：细胞密度达80% - 90%融合（通常每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度2×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液
38.5℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
需预铺Ⅰ型胶原基质（浓度≥5μg/cm²）
传代后12小时补充肝细胞生长因子（HGF 10ng/mL）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：禽类专用无血清冻存液（含8% DMSO+海藻糖）
细胞密度：冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
消化后细胞经300g离心5分钟，重悬于冻存液
程序降温：38.5℃→4℃（30分钟）→ - 20℃（4小时）→ - 80℃（过夜）→液氮储存
复苏验证：
复苏后48小时进行活力检测（台盼蓝拒染率≥90%）
功能验证：白蛋白分泌量检测（P20代细胞应维持≥5μg/10⁶ cells/24h）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞团聚（需提供温度追踪记录）
2. 7天内经PCR证实禽源病原体污染（如鸭肝炎病毒）
3. 细胞贴壁率低于80%（复苏后72小时评估）
4. 核型分析显示非鸭源染色体
不予重发情形：
1. 未使用推荐胶原包被培养器皿
2. 擅自调整培养温度至哺乳动物常规37℃
3. 超过建议传代代数（P25+）导致的性能衰减
4. 未进行禽类细胞专用支原体检测方法（常规检测试剂盒可能出现假阴性）
