一、细胞基本属性
细胞名称：羊睾丸间质细胞永生化（Immortalized Sheep Testicular Leydig Cells）
细胞别称：iSTLC；永生化睾丸间质细胞；睾丸Leydig细胞
种属来源：羊（Ovis aries）
年龄性别：健康成年雄性羊（供体筛选无生殖系统疾病史）
组织来源：睾丸间质组织（Leydig细胞富集区域）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：多角形或星形，胞质富含脂滴，核仁明显
细胞代数：P10 - P20（经永生化处理，增殖能力稳定）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Leydig Cell Specialized Medium（含10% FBS+睾酮合成诱导因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养基激素浓度及细胞密度）
供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡后换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液），37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止消化
注意事项：避免频繁观察干扰细胞贴壁，传代后48小时内避免换液以维持激素分泌功能
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤：离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液后分装至冻存管；梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证：复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）；功能验证：睾酮分泌能力检测（P10代细胞应维持基础激素合成水平）
四、售后服务承诺
重发标准：1. 运输温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控报告）；2. 7天内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）；3. 复苏后细胞贴壁率低于80%（需提供显微图像记录）；4. 永生化标志基因PCR验证不通过
不予重发情形：1. 未按推荐方法进行胶原包被导致细胞脱落；2. 擅自添加未经验证的激素或抑制剂；3. 使用非密闭培养系统引发交叉污染；4. 超过说明书建议的传代次数导致功能退化
（注：内容均基于标准操作流程，实际应用需结合实验室具体条件优化。）
